A simple method for modifying genes in a recombination deficient host cell
is disclosed. Such modifications include generating insertions, deletions,
substitutions, and/or point mutations at any chosen site in the
independent origin based cloning vector. The modified gene is contained in
an independent origin based cloning vector that is used to introduce a
modified heterologous gene into a cell. Such a modified vector may be used
in the production of a germline transmitted transgenic animal, or in gene
targeting protocols in eukaryotic cells. In particular, high throughput
methodology is provided for generating the modified the independent origin
based cloning vectors of the present invention.
Een eenvoudige methode om genen in een cel van de nieuwe combinatie ontoereikende gastheer te wijzigen wordt onthuld. Dergelijke wijzigingen omvatten het produceren van toevoegingen, schrappingen, substituties, en/of puntveranderingen bij om het even welke gekozen plaats in de onafhankelijke oorsprong gebaseerde het klonen vector. Het gewijzigde gen is bevat in een onafhankelijke oorsprong gebaseerde het klonen vector die wordt gebruikt om een gewijzigd heteroloog gen in een cel te introduceren. Een dergelijke gewijzigde vector kan in de productie van een germline overgebracht transgenic dier, of in gen worden gebruikt dat protocollen in eukaryotic cellen richt. In het bijzonder wordt de hoge productiemethodologie verstrekt voor het produceren van gewijzigd de onafhankelijke oorsprong gebaseerde het klonen vectoren van de onderhavige uitvinding.
