Cell membranes containing glycolipid-enriched membrane (GEM) and
non-glycolipid-enriched membrane (non-GEM) domains are targeted using
fusion proteins that are anchored in the cell membrane. Fusion proteins to
target GEM (or non-GEM) domains are comprised of a selected fluorescent
polypeptide, a membrane-targeting sequence of p56.sup.Lck (or
pp60.sup.c-Src for non-GEM domains) and a linker inserted between the
polypeptide and the membrane targeting sequence. Localization of fusion
proteins in GEM and non-GEM domains is assessed using techniques including
confocal microscopy, fluorescence-based techniques, and membrane
fractionation. Using these techniques, compounds are screened for their
effect on GEM and non-GEM domains of live cells. These fusion proteins
therefore represent useful tools for studying subcellular trafficking and
the function of discrete compartments in the plasma membrane.
De membranen van de cel glycolipid-verrijkt membraan (GEM) bevatten en de niet-glycolipid-verrijkte membraan (niet-gem) worden domeinen die gericht gebruikend fusieproteïnen die in het celmembraan worden verankerd. De proteïnen van de fusie de domeinen aan van de doelgem (of van de niet-gem worden) samengesteld van een geselecteerd fluorescent polypeptide, een membraan-richtende opeenvolging van p56.sup.Lck (of pp60.sup.c-src voor niet-gemdomeinen) en linker die tussen het polypeptide en het membraan richtend opeenvolging wordt opgenomen. De localisatie van fusieproteïnen in wordt de domeinen van de GEM en van de niet-gem beoordeeld gebruikend technieken met inbegrip van confocal microscopie, op fluorescentie-gebaseerde technieken, en membraanopdeling. Gebruikend deze technieken, zijn de samenstellingen onderzocht voor hun effect op de domeinen van de GEM en van de niet-gem van levende cellen. Deze fusieproteïnen vertegenwoordigen daarom nuttige hulpmiddelen om het subcellular handel drijven en de functie te bestuderen van afzonderlijke compartimenten in het plasmamembraan.
