The present invention provides silica-based reversed-phase HPLC methods
that lead to higher retention of the analytes in the column and longer
column lifetimes than usually observed under medium to high pH aqueous
mobile phase conditions. The inventive methods comprise eluting the HPLC
column using an aqueous mobile phase comprising at least one fluorinated
additive. Preferred additives are polyfluorinated alcohols such as
2,2,2-trifluoroethanol and 1,1,1,3,3,3-hexafluoroisopropanol. The methods
of the present invention may be used for analyzing, separating,
purifying, and/or isolating small organic molecules, natural products, as
well as biomolecules such as polypeptides, oligonucleotides and
polynucleotides (e.g., DNA fragments).
Η παρούσα εφεύρεση παρέχει τις πυρίτιο-βασισμένες αντίστροφης φάσης μεθόδους HPLC που οδηγούν στην υψηλότερη διατήρηση των καταλοίπων στη στήλη και την πιό μακροχρόνια διάρκεια ζωής στηλών από συνήθως παρατηρηθείσα κάτω από το μέσο στους υψηλούς όρους κινητής φάσης pH υδάτινους. Οι εφευρετικές μέθοδοι περιλαμβάνουν το διαχωρισμό με εκχύλιση της στήλης HPLC χρησιμοποιώντας μια υδάτινη κινητή φάση περιλαμβάνοντας τουλάχιστον μια φθοριωμένη πρόσθετη ουσία. Οι προτιμημένες πρόσθετες ουσίες είναι τα οινοπνεύματα όπως 2,2,2-trifluoroethanol και 1,1,1,3,3,3-hexafluoroisopropanol. Οι μέθοδοι της παρούσας εφεύρεσης μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ανάλυση, το χωρισμό, τον καθαρισμό, ή/και την απομόνωση των μικρών οργανικών μορίων, των φυσικών προϊόντων, καθώς επίσης και των βιομορίων όπως polypeptides, oligonucleotides και polynucleotides (π.χ., τεμάχια DNA).
