Method for determining and modifying protein/peptide solubility

   
   

A solubility reporter for measuring a protein's solubility in vivo or in vitro is described. The reporter, which can be used in a single living cell, gives a specific signal suitable for determining whether the cell bears a soluble version of the protein of interest. A pool of random mutants of an arbitrary protein, generated using error-prone in vitro recombination, may also be screened for more soluble versions using the reporter, and these versions may be recombined to yield variants having further-enhanced solubility. The method of the present invention includes "irrational" (random mutagenesis) methods, which do not require a priori knowledge of the three-dimensional structure of the protein of interest. Multiple sequences of mutation/genetic recombination and selection for improved solubility are demonstrated to yield versions of the protein which display enhanced solubility.

Un journaliste de solubilité pour une solubilité du des protéines de mesure in vivo ou in vitro est décrit. Le journaliste, qui peut être employé dans une cellule vivante simple, donne un signal spécifique approprié à déterminer si la cellule soutient une version soluble de la protéine d'intérêt. Une piscine des mutants aléatoires d'une protéine arbitraire, produits en utilisant la recombinaison in vitro error-prone, peut également être examinée pour des versions plus solubles en utilisant le journaliste, et ces versions peuvent être recombinées pour rapporter des variantes loin-ayant augmenté la solubilité. La méthode de la présente invention inclut les méthodes "irrationnelles" (de mutagénèse aléatoire), qui n'exigent pas la connaissance a priori de la structure tridimensionnelle de la protéine d'intérêt. Des ordres multiples de la recombinaison et du choix de mutation/genetic pour la solubilité améliorée sont démontrés aux versions de rendement de la protéine qui montrent la solubilité augmentée.

 
Web www.patentalert.com

< Simultaneous stimulation and concentration of cells

< Magnetic particles as solid phase for multiplex flow assays

> Production method of polyester containing epoxy group in side chain and production method of crosslinked polymer

> Peptides that deliver antisense oligonucleotides which downregulate protein expression in cells

~ 00167