The present invention discloses a method for effectively isolating and
purifying a physiological active dauer pheromone compound having the
following structural formula I related to aging and stress of C. elegans,
and determination of the structure of such material. First, ethanol
extract is prepared by completely concentrating a liquid medium with
ethanol after culturing C. elegans on a S. basal liquid medium, and then
this ethanol fraction is further extracted with ethyl acetate. Then,
impurities are removed from ethyl acetate extract by a silica-gel
adsorption chromatography and a pheromone extract is isolated and
purified by amine column chromatographic procedures using various
solvents as eluent. Finally, a pheromone compound having structural
formula I is completely isolated and characterized by size-exclusion
HPLC.
A invenção atual divulga um método para eficazmente isolar e purifying um composto ativo physiological do pheromone do dauer que tem a seguinte fórmula estrutural I relacionado ao envelhecimento e ao stress de elegans do C., e a determinação da estrutura de tal material. Primeiramente, o extrato do ethanol é preparado completamente concentrando um meio líquido com o ethanol após ter cultivado elegans do C. em um meio líquido basal do S., e esta fração do ethanol é extraída então mais mais com acetato ethyl. Então, as impurezas são removidas do extrato do acetato ethyl por um chromatography do adsorption do silicone-silica-gel e um extrato do pheromone é isolado e purified por procedimentos chromatographic da coluna do amine usando vários solventes como o eluent. Finalmente, um composto do pheromone que tem a fórmula estrutural I completamente é isolado e caracterizado por tamanho-exclusão HPLC.
