Fusion proteins or conjugates are provided containing an amino acid
sequence having a substrate binding region of a polysaccharidase such as
cellulase that binds to a .beta.-1,4-glycan matrix such as cellulose. The
substrate binding region is essentially without polysaccharidase activity.
In the fusion protein, the substrate binding region is fused or chemically
linked to a polypeptide such as an enzyme, a hormone, an immunoglobulin or
a protein dye. By contacting the fusion protein with a .beta.-1,4-glycan
matrix, the substrate binding region binds to the matrix to immobilize the
polypeptide on the matrix. The polypeptide or fusion protein can be
removed from the matrix with a protease acting on a protease recognition
sequence or with a solution having a low ionic strength or high pH. In the
conjugate, the substrate binding region is joined such as by covalent
bonding to a non-protein chemical moiety such as a dye, chromophore,
fluorescor, radionuclide or enzyme co-factor. By contacting the conjugate
with a .beta.-1,4-glycan matrix, the substrate binding region binds to the
matrix to immobilize the chemical moiety on the matrix. The conjugate or
chemical moiety can be removed with a protease acting on a protease
recognition sequence or with a solution having a low ionic strength or
high pH.
Des protéines ou les conjugés de fusion sont fournis contenant un ordre d'acide aminé ayant une région obligatoire de substrat d'un polysaccharidase tel que la cellulase qui lie à une matrice de beta.-1,4-glycan telle que la cellulose. La région obligatoire de substrat est essentiellement sans activité de polysaccharidase. Dans la protéine de fusion, la région obligatoire de substrat est fondue ou chimiquement liée à un polypeptide tel qu'une enzyme, une hormone, une immunoglobuline ou un colorant de protéine. En entrant en contact avec la protéine de fusion avec une matrice de beta.-1,4-glycan, la région obligatoire de substrat lie à la matrice pour immobiliser le polypeptide sur la matrice. Le polypeptide ou la protéine de fusion peut être enlevé de la matrice avec de la protéase agissant sur un ordre d'identification de protéase ou avec une solution ayant une basse concentration ionique ou un pH élevé. Dans le conjugé, la région obligatoire de substrat est jointe comme par la liaison covalente à une partie chimique sans protéines telle qu'un cofacteur de colorant, de chromophore, de fluorescor, de radionucléide ou d'enzymes. En entrant en contact avec le conjugé avec une matrice de beta.-1,4-glycan, la région obligatoire de substrat lie à la matrice pour immobiliser la partie chimique sur la matrice. La partie conjuguée ou chimique peut être enlevée avec de la protéase agissant sur un ordre d'identification de protéase ou avec une solution ayant une basse concentration ionique ou un pH élevé.