This invention provides a process for large-scale purification of living
Japanese encephalitis virus (JEV) suitable for use in vaccine preparation
from a JEV source, including a JEV-infected cell culture and a
JEV-infected mouse brain. The process includes the following steps:
(a) obtaining a sample from a JEV-infected mouse brain or a JEV-infected
cell culture,
(b) subjecting the sample to a preliminary separation to remove cell and
cell debris from the sample of step (a),
(c) concentrating the sample from step (b) by ultra-filtration to remove
substances having molecular weight below 100 kDa, and
(d) subjecting the sample concentrate to gel filtration to obtain a
substantially pure fraction of JEV.
Αυτή η εφεύρεση παρέχει μια διαδικασία για το μεγάλης κλίμακας καθαρισμό ιού εγκεφαλίτιδας διαβίωσης του ιαπωνικού (JEV) κατάλληλου για τη χρήση κατά την προετοιμασία εμβολίων από μια πηγή JEV, συμπεριλαμβανομένης μιας ιεβ-μολυσμένης κυτταροκαλλιέργειας και ενός ιεβ-μολυσμένου εγκεφάλου ποντικιών. Η διαδικασία περιλαμβάνει τα ακόλουθα βήματα: (α) λαμβάνοντας ένα δείγμα από έναν ιεβ-μολυσμένο εγκέφαλο ποντικιών ή μια ιεβ-μολυσμένη κυτταροκαλλιέργεια, (β) υποβάλλοντας το δείγμα σε έναν προκαταρκτικό χωρισμό για να αφαιρέσει το κύτταρο και τα συντρίμμια κυττάρων από το δείγμα του βήματος (α), (γ) συγκεντρώνοντας το δείγμα από το βήμα (β) από ultra-filtration για να αφαιρέσει τις ουσίες που έχουν το μοριακό βάρος κάτω από 100 kDa, και (δ) υποβάλλοντας τη συμπύκνωση δειγμάτων στη διήθηση πηκτωμάτων για να λάβει ένα ουσιαστικά καθαρό μέρος JEV.