A method for the enzymatic production of a desired product in a liquid or
supercritical carbon dioxide fluid. The method comprises: (a) providing a
reaction mixture comprising at least one reaction substrate and a
crosslinked enzyme crystal catalyst in a liquid or supercritical carbon
dioxide fluid; and (b) reacting said substrate with said crosslinked
enzyme crystal catalyst in said carbon dioxide fluid to produce said
product. The reacting step is typically followed by the step of (c)
separating the product from said reaction mixture. The crosslinked enzyme
crystal catalyst preferably comprises an enzyme crystal crosslinked with a
multifunctional crosslinking agent, said crosslinked enzyme crystal having
resistance to exogeneous proteolysis, such that the crosslinked enzyme
crystal retains at least about 80 percent of its initial activity after
incubation for three hours in the presence of a concentration of
Pronase.TM. protease that causes the soluble uncrosslinked form of the
enzyme that is crystallized to form said enzyme crystal that is
crosslinked to lose at least about 80 percent of its initial activity
under the same conditions. Reaction mixtures useful for carrying out the
foregoing method and product mixtures produced by the foregoing method are
also disclosed.
Une méthode pour la production enzymatique d'un produit désiré dans un liquide ou un fluide supercritique d'anhydride carbonique. La méthode comporte : (a) fournir un mélange de la réaction comportant au moins un substrat de réaction et un catalyseur en cristal réticulé d'enzymes dans un liquide ou un fluide supercritique d'anhydride carbonique ; et (b) réagissant ledit substrat avec ledit catalyseur en cristal réticulé d'enzymes en ledit fluide d'anhydride carbonique pour produire ledit produit. L'étape de réaction est typiquement suivie de l'étape (c) séparant du produit de ledit mélange de la réaction. Le catalyseur en cristal réticulé d'enzymes comporte de préférence un cristal d'enzymes réticulé avec un agent de réticulation multifonctionnel, ledit cristal réticulé d'enzymes ayant la résistance à la protéolyse exogeneous, telle que le cristal réticulé d'enzymes maintient au moins environ 80 pour cent de son activité initiale après incubation pendant trois heures en présence d'une concentration de la protéase de Pronase.TM. qui cause la forme non réticulée soluble de l'enzyme qui est cristallisée pour former ledit cristal d'enzymes qui est réticulé pour perdre au moins environ 80 pour cent de son activité initiale dans les mêmes conditions. Les mélanges de la réaction utiles pour effectuer les mélanges antérieurs de méthode et de produit produits par la méthode antérieure sont également révélés.