Compositions and methods for expression of heterologous mammalian proteins and their secretion in the biologically active mature form using a yeast host cell as the expression system are provided. Compositions of the invention are nucleotide sequences encoding a signal peptide sequence for a yeast secreted protein, an optional leader peptide sequence for a yeast secreted protein, a native propeptide leader sequence for a mature protein of interest, and a sequence for the mature protein of interest, all operably linked to a yeast promoter. Each of these elements is associated with a processing site recognized in vivo by a yeast proteolytic enzyme. Any or all of these processing sites may be a preferred processing site that has been modified or synthetically derived for more efficient cleavage in vivo. The compositions are useful in methods for expression of heterologous mammalian proteins and their secretion in the biologically active mature form. Particularly, vectors comprising these nucleotide coding sequences can be used to transform a yeast host cell, which can then be cultured and screened for secretion of the biologically active mature protein of interest.

De samenstellingen en de methodes voor uitdrukking van heterologe zoogdierproteïnen en hun afscheiding in de biologisch actieve rijpe vorm die een cel van de gistgastheer gebruikt als uitdrukkingssysteem worden verstrekt. De samenstellingen van de uitvinding zijn nucleotideopeenvolgingen coderend een signaalpeptide opeenvolging voor een gist afgescheiden proteïne, een facultatieve leiderspeptide opeenvolging voor een gist afgescheiden proteïne, een inheemse opeenvolging van de propeptideleider voor een rijpe proteïne van belang, en een opeenvolging voor de rijpe proteïne van belang, allen operably met betrekking tot een gistpromotor. Elk van deze elementen wordt met een verwerkingsplaats geassocieerd die in vivo door een gist proteolytic enzym wordt erkend. Om het even welk of elk van deze verwerkingsplaatsen kunnen een aangewezen verwerkende plaats zijn die in vivo is gewijzigd of synthetisch voor efficiënter splijten afgeleid. De samenstellingen zijn nuttig in methodes voor uitdrukking van heterologe zoogdierproteïnen en hun afscheiding in de biologisch actieve rijpe vorm. In het bijzonder, kunnen bestaan de vectoren die uit deze opeenvolgingen van de nucleotidecodage worden gebruikt om een cel van de gistgastheer om te zetten, die dan kan voor afscheiding van de biologisch actieve rijpe proteïne van belang worden gecultiveerd en worden onderzocht.