Methods and compositions for detecting molecular interactions, particularly
protein-protein interactions, are provided. The invention allows detection
of such interactions in living cells or in vitro. Detection of molecular
interactions in living cells is not limited to the nuclear compartment,
but can be accomplished in the cytoplasm, cell surface, organelles, or
between these entities. In one embodiment, the method utilizes novel
compositions comprising fusion proteins between the molecules of interest
and two or more inactive, weakly-complementing .beta.-galactosidase
mutants. Association between the molecules of interest brings the
complementing .beta.-galactosidase mutants into proximity so that
complementation occurs and active .beta.-galactosidase is produced. The
active .beta.-galactosidase may be detected by methods well-known in the
art. Among the uses of the invention are the study of protein-protein
interactions, functional genomics, agonist and antagonist screening and
drug discovery.
Os métodos e as composições para detectar interações molecular, particularmente interações da proteína-proteína, são fornecidos. A invenção permite a deteção de tais interações em pilhas vivas ou em vitro. A deteção de interações molecular em pilhas vivas não é limitada ao compartimento nuclear, mas pode ser realizada no cytoplasm, superfície da pilha, organelles, ou entre estas entidades. Em uma incorporação, o método utiliza as composições da novela que compreendem proteínas da fusão entre as moléculas do interesse e dois ou mais inativos, fraco-complementando mutants do beta.-beta.-galactosidase. A associação entre as moléculas do interesse traz os mutants complementando do beta.-beta.-galactosidase na proximidade de modo que a complementação ocorra e o beta.-beta.-galactosidase ativo seja produzido. O beta.-beta.-galactosidase ativo pode ser detectado por métodos well-known na arte. Entre os usos da invenção são o estudo de interações da proteína-proteína, o genomics funcional, a seleção do agonist e do antagonista e a descoberta da droga.
