The invention provides a novel retroviral packaging system, in which
retroviral packaging plasmids and packagable vector transcripts are
produced from high expression plasmids after stable or transient
transfection in mammalian cells. High titers of recombinant retrovirus are
produced in these transfected mammalian cells and can then transduce a
mammalian target cell by cocultivation or supernatant infection. The
methods of the invention include the use of the novel retroviral packaging
plasmids and vectors to transduce primary human cells, including T cells
and, human hematopoietic stem cells, with foreign genes by cocultivation
or supernatant infection at high efficiencies. The invention is is useful
for the rapid production of high titer viral supernatants, and to
transduce with high efficiency cells that are refractory to transduction
by conventional means.
La invención proporciona un sistema de empaquetado retroviral de la novela, en el cual los plasmids de empaquetado retroviral y las transcripciones packagable del vector se producen de plasmids altos de la expresión después del transfection estable o transitorio en células mamíferas. Los altos títulos del retrovirus recombinant se producen en éstos transfected las células mamíferas y el transduce de la lata entonces una célula mamífera de la blanco por el cocultivation o la infección flotante. Los métodos de la invención incluyen el uso de los plasmids y de los vectores de empaquetado retroviral de la novela a las células humanas primarias del transduce, incluyendo las células de T y, a las células de vástago hematopoietic humanas, con los genes extranjeros por el cocultivation o la infección flotante en las eficacias altas. La invención es es útil para la producción rápida de los supernatants virales del alto título, y al transduce con las células de la eficacia alta que son refractarias al transduction por medios convencionales.