Methods and materials are provided for stably introducing any gene into a specific locus in the genome of a microorganism such as yeast without the addition of any drug resistance genes. Specifically provided herein are new genetically engineered inositol-overproducing Saccharomyces cerevisiae strains obtained by using a novel set of yeast integration plasmids that allow the safe, stable, and controlled introduction of homologous as well as heterologous genes into the host genome. In particular, specific loci of the S. cerevisiae yeast genome can be targeted with single or multiple copies of a specific gene that is desired to be expressed or a given set of specific genes that the host can use without the addition of any drug resistance genes. The principles of this new methodology can also be used for the construction of other recombinant yeast and bacterial strains as well as higher eukaryotic cells.

De methodes en de materialen worden verstrekt voor stabiel het introduceren van om het even welk gen in een specifieke plaats in het genoom van een micro-organisme zoals gist zonder de toevoeging van enige genen van de drugweerstand. Op voorwaarde dat specifiek hierin nieuwe genetisch gebouwde inositol-te veel producerende Saccharomyces cerevisiae spanningen die door een nieuwe reeks plasmiden worden verkregen zijn van de gistintegratie te gebruiken die de veilige, stabiele, en gecontroleerde introductie van homologe evenals heterologe genen in het gastheergenoom toestaan. In het bijzonder kunnen de specifieke plaatsen van het cerevisiae de gistgenoom van S. met enige of veelvoudige exemplaren van een specifiek gen worden gericht dat wordt gewenst worden uitgedrukt of een bepaalde reeks specifieke genen die de gastheer zonder de toevoeging van enige genen van de drugweerstand kan gebruiken. De principes van deze nieuwe methodologie kunnen ook voor de bouw van andere recombinante gist en bacteriële spanningen evenals hogere eukaryotic cellen worden gebruikt.