The present invention provides a highly sensitive and practical method for
the determination of and the separation of 5-hydroxycreatinine from a
sample of bodily fluid. The method of the present invention is useful as a
method for the testing of renal dysfunction, such as uremia, chronic
nephritis and closure of the urinary tract, etc. A separation solvent of
pH 4.1 to 4.6 is used in a high performance liquid chromatography step
that is carried out using a strongly acidic cation-exchange resin, such as
a styrene-divinylbenzene resin. The determination sensitivity is a
concentration of only about 0.02 .mu.M, whereby 5-hydroxycreatinine in
blood of healthy persons can be determined for the first time. Moreover,
only one separation solvent, such as a citrate, need be used and the cycle
time for analysis is only about 14 minutes per measurement. Thus, a
practitioner using one set of HPLC equipment is able to carry out about
100 determinations per day.
De onderhavige uitvinding verstrekt een hoogst gevoelige en praktische methode voor de bepaling van en de scheiding van 5-hydroxycreatinine van een steekproef van lichamelijke vloeistof. De methode van de onderhavige uitvinding is nuttig als methode voor het testen van nierdysfunctie, zoals uremie, chronische nefritis en sluiting van de urinelandstreek, enz. Een scheidingsoplosmiddel van pH 4,1 tot 4,6 wordt gebruikt in een stap van de hoge prestaties vloeibare chromatografie die gebruikend een sterk zuurrijke kationenuitwisselingshars, zoals een styreen-divinylbenzene hars wordt uitgevoerd. De bepalingsgevoeligheid is een concentratie van slechts ongeveer 0,02 mu.M, waardoor 5-hydroxycreatinine in bloed van gezonde personen kan voor het eerst worden bepaald. Voorts moet slechts één scheidingsoplosmiddel, zoals een citraat, worden gebruikt en de cyclustijd voor analyse is slechts ongeveer 14 minuten per meting. Aldus, kan een vakman die één reeks van HPLC materiaal gebruikt ongeveer 100 bepalingen per dag uitvoeren.