Described is a new approach to fluorescence sensing based on a mixture of
fluorophores, one of which is sensitive to the desired analyte. If a long
lifetime analyte-insensitive fluorophore is mixed with a short lifetime
analyte-sensitive fluorophore, the modulation of the emission at
conveniently low frequencies becomes equal to the fractional fluorescence
intensity of the sensing fluorophore. Under these conditions the
modulation can be used to determine the analyte concentration. This can be
used with any fluorophore which changes intensity in response to analyte,
and does not require the sensing fluorophore to display a change in
lifetime. The feasibility of modulation-based sensing was demonstrated
using mixtures of 6-carboxyfluorescein and [Ru2,2'(bipyridyl).sub.3
].sup.2+ as a pH sensor and of the calcium probe Fluo-3 and
[Ru2,2'(bipyridyl).sub.3 ].sup.2+ as a calcium sensor.
È descritto un nuovo metodo al rilevamento di fluorescenza basato su una miscela dei fluorophores, uno di cui è sensibile al analyte voluto. Se un fluorophore analyte-insensibile di corso della vita lungo è mescolato con un fluorophore analyte-sensibile di corso della vita corto, la modulazione dell'emissione alle frequenze convenientemente basse diventa uguale all'intensità frazionaria di fluorescenza del fluorophore di rilevamento. In queste circostanze la modulazione può essere usata per determinare la concentrazione nel analyte. Ciò può essere usata con tutto il fluorophore che cambia l'intensità in risposta a analyte e non richiede il fluorophore di rilevamento visualizzare un cambiamento nel corso della vita. La fattibilità di rilevamento modulazione-basato è stata dimostrata usando lle miscele di 6-carboxyfluorescein e [ Ru2,2'(bipyridyl).sub.3 ].sup.2+ come sensore di pH e della sonda Fluo-3 del calcio e [ Ru2,2'(bipyridyl).sub.3 ].sup.2+ come sensore del calcio.
