Methods for the multiplexed detection of the binding of, or interaction
between, one or more ligands and target antiligands are provided.
Detection involves the release of identifying tags as a consequence of
target recognition. The methods include the use of electrophoretic tag
probes or e-tag probes, comprising a detection region and a
mobility-defining region called the mobility modifier, both linked to a
target-binding moiety. In practicing the methods, target antiligands are
contacted with a set of e-tag probes and the contacted antiligands are
treated with a selected cleaving agent resulting in a mixture of e-tag
reporters and uncleaved and/or partially cleaved e-tag probes. The mixture
is exposed to a capture agent effective to bind to uncleaved or partially
cleaved e-tag probes, followed by electrophoretic separation. In a
multiplexed assay, different released e-tag reporters may be separated and
detected providing for target identification.
Os métodos para a deteção multiplexed do emperramento, ou a interação de no meio, um ou os mais ligands e antiligands do alvo são fornecidos. A deteção envolve a liberação de identificar Tag em consequência do recognition do alvo. Os métodos incluem o uso de pontas de prova electrophoretic do Tag ou de pontas de prova de e-tag, compreendendo uma região da deteção e uma região mobilidade-definindo chamadas o modificador da mobilidade, ambos ligados a um moiety alvo-ligando. Em praticar os métodos, os antiligands do alvo são contatados com um jogo de pontas de prova de e-tag e os antiligands contatados são tratados com um agente cleaving selecionado tendo por resultado uma mistura de repórteres de e-tag e uncleaved e/ou cleaved parcialmente pontas de prova de e-tag. A mistura é exposta a um agente da captação eficaz ligar a uncleaved ou cleaved parcialmente as pontas de prova de e-tag, seguidas pela separação electrophoretic. Em um assay multiplexed, os repórteres liberados diferentes de e-tag podem ser separados e fornecer detectado para a identificação do alvo.
