A recombinant DNA containing a sequence (1) coding for a polypeptide
heterologous to a filamentous haemagglutinin of Bordetella (Fha) fused
within the reading frame to a sequence (2) located upstream from the first
sequence. Sequence (2) codes for at least part of the Fha precursor, which
part comprises at least the N-terminal region of a truncated mature Fha
protein, which contains the interaction site of Fha and heparin and the
secretion domain. This Fha protein is under the control of a promoter
recognized by the cell polymerases of B. pertussis and is inserted into a
B. pertussis cell culture, is expressed in the culture and excreted into
the cell culture medium. The invention uses both the abilities of
Bordetella and particularly B. pertussis to secrete or surface expose the
heterologous polypeptide fused to the Fha portion corresponding to
sequence (2), which does not appear to produce extracellular proteases,
and the ease with which filamentous haemagglutinins can be isolated from
other Bordetella proteins.
Un DNA recombinant che contiene una codificazione di sequenza (1) per un polipeptide eterologo ad un'emagglutinina filamentosa di Bordetella (Fha) ha fuso all'interno della struttura della lettura ad una sequenza (2) situata a monte dalla prima sequenza. Codici di sequenza (2) per almeno la parte del precursore di Fha, che la parte contiene almeno la regione del N-terminale una proteina matura troncata di Fha, che contiene il luogo di interazione di Fha e l'eparina ed il dominio di secrezione. Questa proteina di Fha è sotto il controllo di un promotore riconosciuto dalle polimerasi delle cellule del pertussis del B. ed è inserita in una coltura delle cellule di pertussis del B., è espressa nella coltura ed è espulsa nel terreno di coltura delle cellule. L'invenzione usa sia le capacità di Bordetella che specialmente il pertussis del B. di secernere o emergere denunzia il polipeptide eterologo fuso alla parte di Fha che corrisponde alla sequenza (2), che non sembra produrre le proteasi extracellulari ed alla facilità con cui le emagglutinine filamentose possono essere isolate da altre proteine di Bordetella.
