The invention is directed to methods for purifying Troponin I, particularly
recombinant Tropnin I produced in a bacterial expression system.
Recombinant Tropnin I can be advantageously purified after reversibly
protecting the free sulfhydryl groups, e.g., by forming sulfates. In a
specific example, Tropnin I reacted with sodium tetrafhionate yielded
sulfitolyzed Tropnin I, which was purified by chromatography on an anion
exchanger, followed by hydrophobic interaction chromatography. Facile
deprotection of the sulfhydryl groups yields a highly purified product
ready for refolding.
Η εφεύρεση κατευθύνεται στις μεθόδους για troponin Ι, ιδιαίτερα ανασυνδυαζόμενο Tropnin που παρήγαγα σε ένα βακτηριακό σύστημα έκφρασης. Ανασυνδυαζόμενο Tropnin μπορώ να καθαριστώ ευνοϊκά μετά από ανατρεπτικά να προστατεύσω τις ελεύθερες sulfhydryl ομάδες, π.χ., με τη διαμόρφωση των θειικών αλάτων. Σε ένα συγκεκριμένο παράδειγμα, Tropnin που αντέδρασα με το νάτριο tetrafhionate που παρήχθη Tropnin Ι, το οποίο καθαρίστηκε από τη χρωματογραφία σε έναν ανταλλάκτη ανιόντων, που ακολουθήθηκε από την υδροφοβική χρωματογραφία αλληλεπίδρασης. Το ευχερές deprotection των sulfhydryl ομάδων παράγει ένα ιδιαίτερα καθαρισμένο προϊόν αναμένει για.
