A transposable element is provided that as a 3' and a 5' end. The
transposable element includes a 5' recombining site 5' of a nucleic acid
sequence encoding a selectable marker, a 3' recombining site 3' of the
nucleic acid sequence encoding a selectable marker, a nucleic acid
sequence encoding and MHC epitope 5' to the 5' recombining site or 3' to
the 3' recombining site, and an insertion end comprising an inverted
repeat sequence sufficient for integration of the transposable element at
the 5' and the 3' end of the transposable element. In one embodiment, a
transposable element is provided that has a 5' and a 3' end. The
transposable element includes a 5' loxP sequence 5' of a nucleic acid
encoding a selectable marker, a 3' loxP sequences 3' of a nucleic acid
encoding the selectable marker, an MHC epitope 5' to the 5' loxP sequences
or 3' of the 3' loxP sequence, an insertion end at the 5' end of the
transposable element, and an insertion end at the 3' of the transposable
element. A method is provided for detecting an antigenic epitope of a
pathogen by infecting a pathogenic cell with a transposable element of the
invention, wherein the infection results in the integration of the
transposable element in a nucleic acid sequence of the bacterial cell;
transforming the pathogenic cell with a vector comprising a transposase;
contacting a eukaryotic cell that can internalize the pathogenic cell with
the pathogenic cell infected with the transposable element; contacting the
eukaryotic cell with a specific binding partner that recognizes the MHC
epitope; identifying the labeled eukaryotic cells and externalizing the
bacteria cell. The externalized bacterial cell may be grown to produce a
population of bacterial cells, and the nucleic acid sequence of the
bacterial cell that has the integrated transposable element is identified.
This nucleic acid sequence encodes the antigenic element of the panthogen.
A method is also provided for generating a carrier vaccine by infecting a
bacterial cell with the transposable element of the invention, wherein the
transposable further comprises an antigen associated with a disease
operably linked to the MHC epitope of the transposable element. The
infection of the bacteria results in the integration of the transposable
element in a nucleic acid sequence of the bacterial cell. The pathogenic
cell is then internalized into a eukaryotic cell and the eukaryotic cell
is exposed to a specific bindned agent that recognizes the MHC epitope,
identifying labeled eukaryotic cells are identified and lysed to
externalized the bacteria cell, which is cultured to produce a population
of bacterial cells. The nucleic acid sequence of the bacterial cell that
has the integrated transposable element is identified, wherein the nucleic
acid sequence encodes the antigenic element of the pathogen. The graving
bacterial cell identified, and may be used as the carrier vaccine.
Um elemento transposable é contanto que como um 3' e uma extremidade 5'. O elemento transposable inclui um 5' que recombining o local 5' de uma seqüência do ácido nucleic que codificam um marcador selecionável, um 3' que recombining o local 3' da seqüência do ácido nucleic que codifica um marcador selecionável, um encoding da seqüência do ácido nucleic e o epitope 5' de MHC ao 5' que recombining o local ou o 3' ao 3' que recombining o local, e uma extremidade da inserção que compreendem uma seqüência invertida do repeat suficiente para a integração do elemento transposable no 5' e a extremidade 3' do elemento transposable. Em uma incorporação, um elemento transposable está contanto que tem um 5' e uma extremidade 3'. O elemento transposable inclui uma seqüência 5' do loxP 5' de um ácido nucleic que codifica um marcador selecionável, seqüências 3' de um loxP 3' de um ácido nucleic que codifica o marcador selecionável, um epitope 5' de MHC às seqüências do loxP 5' ou 3' da seqüência do loxP 3', uma extremidade da inserção na extremidade 5' do elemento transposable, e em uma extremidade da inserção no 3' do elemento transposable. Um método é fornecido detectando um epitope antigenic de um pathogen infecting uma pilha pathogenic com um elemento transposable da invenção, wherein a infecção resulta na integração do elemento transposable em uma seqüência do ácido nucleic da pilha bacteriana; transformando a pilha pathogenic com um vetor que compreende um transposase; contatando uma pilha eukaryotic que pudesse internalize a pilha pathogenic com a pilha pathogenic infected com o elemento transposable; contatando a pilha eukaryotic com um sócio obrigatório específico que reconheça o epitope de MHC; identificando as pilhas eukaryotic etiquetadas e externalizing as bactérias pilha. Externalized a pilha bacteriana pode ser crescido para produzir uma população de pilhas bacterianas, e a seqüência do ácido nucleic da pilha bacteriana que tem o elemento transposable integrado é identificada. Esta seqüência do ácido nucleic codifica o elemento antigenic do panthogen. Um método é fornecido também gerando uma vacina do portador infecting uma pilha bacteriana com o elemento transposable da invenção, wherein o mais adicional transposable compreende um antígeno associado com uma doença ligada operably ao epitope de MHC do elemento transposable. A infecção das bactérias resulta na integração do elemento transposable em uma seqüência do ácido nucleic da pilha bacteriana. A pilha pathogenic internalized então em uma pilha eukaryotic e a pilha eukaryotic é exposta a um específico bindned o agente que reconhece o epitope de MHC, identificando pilhas eukaryotic etiquetadas é identificada e lysed a externalized a pilha das bactérias, que é cultivada para produzir uma população de pilhas bacterianas. A seqüência do ácido nucleic da pilha bacteriana que tem o elemento transposable integrado é identificada, wherein a seqüência do ácido nucleic codifica o elemento antigenic do pathogen. A pilha bacteriana graving identificada, e pode ser usada como a vacina do portador.
