Recombinant expression of heterologous nucleic acids in protozoa

   
   

The ciliated protozoan Tetrahymena exemplifies a recombinant system for the expression of heterologous nucleic acids, preferably on the plasma membrane surface. Integration of a heterlogous nucleic acid into the .beta.-tubulin gene, BTU1, of a paclitaxel-sensitive T. thermophila mutant that possesses btu1-1K350M .beta.-tubulin allele allows screening for transformants using negative selection, as transformants have restored paclitaxel resistance. Transgenic ciliated protozoa of the invention can serve as live vaccines. For example, transgenic Tetrahymena expressing Ichthyophthirius multifiliis i-antigen protein on their surface are effective vehicles for vaccination of freshwater fish against infection by I. multifiliis.

Ciliated il protozoan Tetrahymena esemplifica un sistema recombinant per l'espressione degli acidi nucleici eterologi, preferibilmente sulla superficie della membrana del plasma. L'integrazione di un acido nucleico heterlogous nel gene del beta.-tubulin, BTU1, di un mutante paclitaxel-sensibile di thermophila del T. che possiede l'allele del beta.-tubulin di btu1-1K350M permette la selezione per i transformants usando la selezione negativa, poichè i transformants hanno ristabilito la resistenza del paclitaxel. Transgenic ciliated i protozoi dell'invenzione può servire da vaccini in tensione. Per esempio, Tetrahymena transgenic che esprime la proteina dell'io-antigene di multifiliis di Ichthyophthirius sulla loro superficie è veicoli efficaci per la vaccinazione dei pesci d'acqua dolce contro l'infezione dai multifiliis del I..

 
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