Detection of surface-associated human leukocyte elastase

   
   

In order to accurately and reliably quantitate HLE on the plasma membranes of the lymphocytes and mononuclear phagocytes, a test sample containing the lymphocytes and mononuclear phagocytes is initially treated with a first antiserum specific for CD4 receptors on the plasma membrane or with a second antiserum specific for chemokine receptors on the plasma membrane. Once the CD4 or chemokine receptors have been rendered non-reactive (competitive) relative to the HLE receptors (also "binding sites") on the plasma membrane, the test sample is contacted with an immunoreagent specific for interaction with one or more of the HLE receptors on the plasma membranes of the lymphocytes and mononuclear phagocytes. The immunoreagent forms a complex with the HLE binding sites and produces a characteristic physical change in the lymphocytes and mononuclear phagocytes that can be monitored by any one of a number of standard techniques, (e.g., confocal laser scanning microscopy and flow cytometry).

En orden cuantifique a exactamente y confiablemente HLE en las membranas del plasma de los linfocitos y los fagocitos mononucleares, una muestra de la prueba que contiene los linfocitos y los fagocitos mononucleares se trata inicialmente con un primer específico del antisuero para los receptores CD4 en la membrana del plasma o con un segundo específico del antisuero para los receptores del chemokine en la membrana del plasma. Una vez que los receptores de CD4 o del chemokine se hayan hecho non-reactive (competitivo) concerniente a los receptores de HLE (también "sitios obligatorios") en la membrana del plasma, la muestra de la prueba se entra en contacto con con un específico immunoreagent para la interacción con uno o más de los receptores de HLE en las membranas del plasma de los linfocitos y de los fagocitos mononucleares. Las formas immunoreagent un complejo con los sitios obligatorios de HLE y producen un cambio físico característico en los linfocitos y los fagocitos mononucleares que pueden ser supervisados por de un número de técnicas estándares, (e.g., microscopia confocal de la exploración del laser y fluir cytometry).

 
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