Disclosed are compositions and a method for detection of nucleic acid
sequences. The disclosed method uses a structured probe to distinguish
between sequences. Structured probes are bifunctional molecules where one
function is as a probe to a target nucleic acid sequence and the other
function is as a detection sequence to facilitate detection of the probe.
Structured probes include a detection sequence, sequence complementary to
a target sequence, and sequences that form duplex regions (higher order
structures). The duplex region is stable unless the probe hybridizes to
the target sequence. The disclosed method involves hybridizing the
structured probe to a target sequence and detecting the detection sequence
on the structured probe. The detection sequence is available for detection
only if the duplex region of the structured probe is disrupted. This links
detection of the structured probe with the hybridization of the structured
probe to the target sequence.
Αποκαλύπτονται οι συνθέσεις και μια μέθοδος για την ανίχνευση των ακολουθιών νουκλεϊνικού οξέος. Η αποκαλυπτόμενη μέθοδος χρησιμοποιεί έναν δομημένο έλεγχο που διακρίνει μεταξύ των ακολουθιών. Οι δομημένοι έλεγχοι είναι διλειτουργικά μόρια όπου μια λειτουργία είναι ως έλεγχος σε μια ακολουθία νουκλεϊνικού οξέος στόχων και η άλλη λειτουργία είναι ως ακολουθία ανίχνευσης για να διευκολύνει την ανίχνευση του ελέγχου. Οι δομημένοι έλεγχοι περιλαμβάνουν μια ακολουθία ανίχνευσης, την ακολουθία συμπληρωματικές σε μια ακολουθία στόχων, και τις ακολουθίες που διαμορφώνουν τις διπλές περιοχές (υψηλότερες δομές διαταγής). Η διπλή περιοχή είναι σταθερή εκτός αν ο έλεγχος υβριδιοποιεί στην ακολουθία στόχων. Η αποκαλυπτόμενη μέθοδος περιλαμβάνει την υβριδοποίηση του δομημένου ελέγχου σε μια ακολουθία στόχων και την ανίχνευση της ακολουθίας ανίχνευσης στο δομημένο έλεγχο. Η ακολουθία ανίχνευσης είναι διαθέσιμη για την ανίχνευση μόνο εάν η διπλή περιοχή του δομημένου ελέγχου αναστατώνεται. Αυτό συνδέει την ανίχνευση του δομημένου ελέγχου με την υβριδοποίηση του δομημένου ελέγχου στην ακολουθία στόχων.