The present invention concerns a method for the quantification of a target
nucleic acid in a sample comprising the following steps: (i)
determination of the amplification efficiency of the target nucleic acid
under defined amplification conditions, (ii) amplification of the target
nucleic acid contained in the sample under the same defined reaction
conditions, (iii) measuring the amplification in real-time, (iv)
quantification of the original amount of target nucleic acid in the
sample by correction of the original amount derived from step (iii) with
the aid of the determined amplification efficiency. The efficiency
correction of PCR reactions according to the invention for the
quantification of nucleic acids can be used for absolute quantification
with the aid of an external or internal standard as well as for relative
quantification compared to the expression of housekeeping genes.
De onderhavige uitvinding betreft een methode voor de getalsmatige weergave van een doel nucleic zuur in een steekproef bestaand uit de volgende stappen: (i) bepaling van de versterkingsefficiency van het doel nucleic zuur in de bepaalde versterkingsomstandigheden, (ii) versterking van het doel nucleic zuur in de steekproef in de zelfde bepaalde reactieomstandigheden, (iii) metend de versterking in real time, (iv) getalsmatige weergave van de originele hoeveelheid doel nucleic zuur in de steekproef door correctie van het originele bedrag dat uit stap (iii) met de hulp van de bepaalde versterkingsefficiency wordt afgeleid. De efficiencycorrectie van PCR reacties volgens de uitvinding voor de getalsmatige weergave van nucleic zuren kan voor absolute getalsmatige weergave met de hulp van een externe of interne norm evenals voor relatieve getalsmatige weergave worden gebruikt in vergelijking met de uitdrukking van huishoudengenen.