Method for the uncoupled, direct, exponential amplification and sequencing of DNA molecules with the addition of a second thermostable DNA polymerase and its application

   
   

Method for sequencing a nucleic acid molecule in a thermocycling reaction which initially comprises a nucleic acid molecule, a first primer, a second primer, a reaction buffer, a first thermostable DNA polymerase, (optionally) a thermostable pyrophosphatase, deoxynucleotides or derivatives thereof and a dideoxynucleotide or a derivative thereof and which is characterized in that the thermocycling reaction additionally contains a second thermostable DNA polymerase which, in comparison to the said first thermostable DNA polymerase, has a reduced ability to incorporate dideoxynucleotides as well as the use of the said method.

Methode für das Der Reihe nach ordnen eines Nukleinsäuremoleküls in einer thermocycling Reaktion, die zuerst ein Nukleinsäuremolekül, eine erste Zündkapsel, eine zweite Zündkapsel, ein Reaktion Puffer, eine erste hitzebeständige DNA Polymerase, (beliebig) eine hitzebeständige Pyrophosphatase, deoxynucleotides oder Ableitungen davon enthält und ein dideoxynucleotide oder eine Ableitung davon und die dadurch gekennzeichnet wird, daß die thermocycling Reaktion zusätzlich eine zweite hitzebeständige DNA Polymerase enthält, die, im Vergleich zu der besagten ersten hitzebeständigen DNA Polymerase, eine verringerte Fähigkeit hat, dideoxynucleotides sowie den Gebrauch von der besagten Methode zu enthalten.

 
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< Overcoming DAPA aminotransferase bottlenecks in biotin vitamers biosynthesis

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