Protein Fragment Complementation Assays (PCA) are done in plant material
using enzyme fragment constructs, for example, dihydrofolate reductase
(DHFR) fragment constructs. Plant material is transformed with at least
two different constructs that form different products capable of
interacting to reconstitute enzymatic activity in the plant material.
Detection of the activity can be done using a substrate for the enzyme in
the culture medium which, when reacted with the enzyme, is converted to a
detectable product. One embodiment uses a substrate that can be
enzymatically converted to a detectable fluorescent product. An inducer
such as rapamycin or salicylic acid can be added to the culture medium to
increase the level of detectable product.
Assays комплементации части протеина (PCA) сделаны в заводском материале использующ стройки части энзима, например, стройки части редуктазы dihydrofolate (DHFR). Заводской материал преобразован с по крайней мере 2 по-разному стройками формируют по-разному продукты способные взаимодействовать для того чтобы воспроизвести ферментационную деятельность в заводском материале. Обнаружение работы можно сделать использующ субстрат для энзима в культурной среде, после того как я прореагирована с энзимом, преобразована к обнаруженному продукту. Одно воплощение использует субстрат можно ферментационно преобразовать к обнаруженному дневному продукту. Inducer such as rapamycin или салициловая кислота можно добавить, что к культурной среде увеличил уровень обнаруженного продукта.
