A method of reconstituting an animal embryo involves transferring a diploid
nucleus into an oocyte which is arrested in the metaphase of the second
meiotic division. The oocyte is not activated at the time of transfer, so
that the donor nucleus is kept exposed to the recipient cytoplasm for a
period of time. The diploid nucleus can be donated by a cell in either the
G0 or G1 phase of the cell cycle at the time of transfer. Subsequently,
the reconstituted embryo is activated. Correct ploidy is maintained during
activation, for example, by incubating the reconstituted embryo in the
presence of a microtubule inhibitor such as nocodazole. The reconstituted
embryo may then give rise to one or more live animal births. The invention
is useful in the production of transgenic animals as well as
non-transgenics of high genetic merit.
Een methode om een dierlijk embryo opnieuw samen te stellen houdt het overbrengen van een diploïde kern in oocyte in die in de metafase van de tweede meiotic afdeling wordt gearresteerd. Oocyte wordt niet geactiveerd op het tijdstip van overdracht, zodat de donorkern die aan het ontvankelijke cytoplasma voor een tijdspanne wordt blootgesteld wordt gehouden. De diploïde kern kan door een cel in of G0 worden geschonken of G1 fase van de celcyclus op het tijdstip van overdracht. Later, wordt het opnieuw samengestelde embryo geactiveerd. Correcte ploidy wordt gehandhaafd tijdens activering, bijvoorbeeld, door het opnieuw samengestelde embryo in aanwezigheid van een microtubuleinhibitor zoals nocodazole uit te broeden. Het opnieuw samengestelde embryo kan tot één of meerdere levende dierlijke geboorten dan leiden. De uitvinding is nuttig in de productie van transgenic dieren evenals niet-transgenics van hoge genetische verdienste.