The invention provides a microinsertion-based, trans-complementation method
of in vitro oocyte activation useful to identify properties of sperm-borne
oocyte-activating factor(s) (SOAF) and ooplasmic interactions with sperm
components at fertilization. The invention provides at least one
detergent-insoluble heat-sensitive component of the perinuclear matrix of
a spermatozoon (SOAF.sub.m) that acts coordinately with at least one
heat-stable submembrane sperm component. SOAF.sub.m is solubilized in
vitro (SOAF.sub.s) under reducing conditions similar to those encountered
in the ooplasm. By the method of the invention, the failure of
heat-inactivated demembranated sperm heads to activate an egg is rescued
by coinsertion of SOAF.sub.s into an oocyte. SOAF.sub.s is
protease-sensitive and is liberated from demembranated heads in a
temperature-dependent manner that inversely correlates with the ability of
demembranated sperm heads to activate oocytes.
A invenção fornece um método microinsertion-baseado, da transporte-complementação na ativação do oocyte de vitro útil identificar propriedades do sperm-carregado oocyte-ativar o factor(s) (SOAF) e umas interações ooplasmic com componentes do sperm no fertilization. A invenção fornece ao menos um componente heat-sensitive detergente-detergent-insoluble da matriz perinuclear de um spermatozoon (SOAF.sub.m) esse atos coordinately com ao menos o um componente heat-stable do sperm do submembrane. SOAF.sub.m solubilized em vitro (SOAF.sub.s) sob reduzir as circunstâncias similares àquelas encontradas no ooplasm. Pelo método da invenção, a falha do calor-heat-inactivated demembranated as cabeças do sperm para ativar um ovo é salvada pelo coinsertion de SOAF.sub.s em um oocyte. SOAF.sub.s é protease-sensível e liberated de demembranated as cabeças em uma maneira temperatura-dependente que correlacione inversa com a abilidade do demembranated as cabeças do sperm para ativar oocytes.