The quality of images produced by confocal microscopy, and especially
scanning laser confocal microscopy, is enhanced especially for images
obtained in turbid mediums such as many biological tissue specimens, by
reducing speckle from scatterers that exist outside (above and below) the
focal plane region which is being imaged by utilizing sheared beams, both
of which are focused to spots in the focal or image plane (region of
interest) and polarizing the beams to have opposite senses of circular
polarization (right and left handed circular polarization). The return
light from the image plane of certain polarization is detected after
passing through the confocal aperture of the confocal microscope. Light
from scatterers outside the region of interest, which are illuminated by
both of the sheared beams, interfere thereby reducing speckle due to such
scatterers, and particularly scatters which are adjacent to the image
plane. Sheared beams having orthogonal linear polarization, as may be
obtained from a Wollaston or Nomarski prism are converted into circularly
polarized beams of opposite polarization sense by a quarter wave plate.
The optical signals representing reflections from the focal plane are
derived by polarizing optics which may either, be a polarizing
beamsplitter in the incident beam path or with a retarder and analyzer.
The retarder may be selected to provide different polarization phase shift
of the return light, and with the analyzer, detects the degree of
elliptical polarization representing the optical activity and circular
dichroism producing the optical signal representing the image.
A qualidade das imagens produziu microscopy confocal pelo laser confocal do microscopy, e especial fazer a varredura, é realçada especial para as imagens obtidas em meios turbid tais como muitos espécimes biológicos do tecido, reduzindo o salpico dos scatterers que existem fora (acima de e abaixo) da região plana focal que está sendo imaged utilizando os feixes cortados, ambos que são focalizados aos pontos no plano focal ou de imagem (região do interesse) e em polarizar os feixes para ter oposto aos sentidos do polarization circular (polarization circular direito e canhoto). A luz do retorno do plano de imagem de determinado polarization é detectada após a passagem através da abertura confocal do microscópio confocal. Ilumine dos scatterers fora da região do interesse, que são iluminados por ambos os feixes cortados, interferem desse modo reduzindo o salpico devido a tais scatterers, e particularmente os scatters que são junto ao plano de imagem. Os feixes cortados que têm o polarization linear orthogonal, como pode ser obtido de um prisma de Wollaston ou de Nomarski são convertidos em feixes circular polarizados do sentido oposto do polarization por uma placa de um quarto da onda. Os sinais óticos que representam reflexões do plano focal são derivados polarizando o sistema ótico que pode, para ser um beamsplitter polarizando no trajeto de feixe do incident ou com um retarder e um analisador. O retarder pode ser selecionado para fornecer o deslocamento de fase diferente do polarization da luz do retorno, e com o analisador, detecta o grau de polarization elíptico representar a atividade ótica e o dichroism circular produzindo o sinal ótico que representa a imagem.
