The present invention pertains to a method for efficiently introducing
exogenous genes into stem cells, particularly human stem cells. The method
optionally includes the steps of inducing the proliferation of target
cells by pre-stimulation with cytokines and/or growth factors, followed by
incubating these cells with RD114-pseudotyped vector particles. In a
specific embodiment, the vector particles are retronectin-immobilized or
ultracentrifugation-concentrated retroviral vector particles pseudotyped
with the feline endogenous retrovirus (RD114) envelope protein. The
present invention further discloses a method for somatic gene therapy,
which can be used for various therapeutic applications and involves
introducing a gene of interest contained within the retroviral genome into
human repopulating stem cells followed by introducing these cells into a
human host. Finally, the present invention discloses a method for
monitoring the efficiency of the stem cell-mediated gene transfer based on
detecting the presence of the genes (or the expression products) of the
retroviral vector in various stem cell-derived lineages of the host.
La actual invención pertenece a un método para eficientemente introducir genes exógenos en las células de vástago, particularmente células de vástago humanas. El método incluye opcionalmente los pasos de inducir la proliferación de las células de la blanco por el pre-esti'mulo con cytokines y/o factores del crecimiento, seguida incubando estas células con las partículas del vector de RD114-pseudotyped. En una encarnación específica, retronectin-se inmovilizan las partículas del vector o las partículas retroviral ultracentrifugacio'n-concentradas del vector pseudotyped con la proteína endógena felina del sobre del retrovirus (RD114). La actual invención más futura divulga un método para la terapia somática del gene, que se puede utilizar para los varios usos terapéuticos e implica el introducir de un gene del interés contenido dentro del genoma retroviral en las células de vástago repopulating humanas seguidas introduciendo estas células en un anfitrión humano. Finalmente, la actual invención divulga un método para supervisar la eficacia de la transferencia transmitida por células del gene del vástago basada en la detección de la presencia de los genes (o de los productos de la expresión) del vector retroviral en los linajes ce'lula-derivados vario vástago del anfitrión.
