A membrane receptor reagent and assay is disclosed in which liposomes are
bound to an evanescent wave emitting surface. Membrane receptors on the
liposome's fluid lipid bilayer membrane are labeled with a fluorescent or
luminescent moiety. These membrane receptors are free to diffuse randomly
throughout the liposome surface, and thus tend to redistribute according
to externally applied forces. The evanescent wave-emitting surface
additionally contains reagents that reversibly bind to the membrane
receptors, tending to bring them closer to region of high evanescent wave
intensity. Test analytes that disrupt or promote the association between
the membrane receptors and the surface reagents act to change the average
distance between the membrane receptors and the evanescent wave emitting
surface, resulting in a change in the fluorescent or luminescent signal.
This reagent and assay system functions with physiologically important
membrane receptors such as GPCR receptors, other 7-tm receptors, drug
transport proteins, cytochrome P450 membrane proteins and other clinically
important membrane components. The reagent and assay methods may be
incorporated into microarrays, capillaries, flow cells and other devices,
and used for drug discovery, ADMET, and other biomedically important
assays.
Um reagent e um assay do receptor da membrana são divulgados em que os liposomes são limitados a uma onda evanescent que se emite a superfície. Os receptors da membrana na membrana fluida do bilayer do lipid do liposome são etiquetados com um moiety fluorescente ou luminescent. Estes receptors da membrana estão livres difundir aleatòria durante todo a superfície do liposome, e tendem assim a redistribute de acordo com forças externamente aplicadas. A superfície acen-emitindo-se evanescent contem adicionalmente os reagents que ligam reversìvel aos receptors da membrana, tendendo a trazê-los mais perto da região da intensidade evanescent elevada da onda. Teste os analytes que disrupt ou promovem a associação entre os receptors da membrana e os reagents de superfície aja para mudar a distância média entre os receptors da membrana e a onda evanescent que se emitem a superfície, tendo por resultado uma mudança no sinal fluorescente ou luminescent. Estes reagent e sistema de assay funcionam com os receptors physiologically importantes da membrana tais como os receptors de GPCR, os outros receptors de 7-tm, as proteínas do transporte da droga, as proteínas da membrana do cytochrome P450 e outros componentes clìnica importantes da membrana. Os métodos do reagent e de assay podem ser incorporados em microarrays, em capilares, em pilhas do fluxo e em outros dispositivos, e ser usados para a descoberta da droga, o ADMET, e outros assays biomedically importantes.
